北京微构工场生物技术有限公司

本发明涉及重组蛋白生物制造领域，公开了一种基于耦联低温响应开关的盐单胞菌()重组蛋白生产方法、工程菌及表达载体。所述低温响应开关包括冷失活型转录调控蛋白和热失活型TEV蛋白酶(TEV：烟草蚀纹病毒蛋白酶)，在第一温度下抑制目标基因表达并促进菌体生长，降至第二温度后解除转录抑制并增强目标重组蛋白表达。所述体系尤其适用于持续表达、过早表达或高水平表达会对宿主细胞生长、蛋白生产能力或遗传稳定性产生不利影响的重组蛋白，优选为苏云氏芽孢杆菌()杀虫蛋白。所述体系优选通过温度变化触发表达转换，无需加入外源化学诱导剂，并可结合宿主工程及发酵工程优化，实现具有生物活性的目标重组蛋白高效生产。