河南中医药大学

本发明公开了一种标准化结肠癌体外缺氧微环境建模方法及应用，属于生物领域。本发明请求保护一种结肠癌体外缺氧微环境建模方法，包括结肠癌细胞培养、缺氧诱导和质控验证；其中，所述缺氧诱导的诱导剂为氯化钴或其水合盐，诱导浓度为90~110μM，诱导时间为22~26h；所述质控验证包括细胞增殖活力验证、细胞形态学验证、缺氧标志蛋白HIF‑1α表达水平验证、糖酵代谢产物乳酸含量验证和全转录组特征基因表达谱验证。本发明摒弃仅检测HIF‑1α单一蛋白的传统验证手段，建立包含细胞增殖、细胞形态、标志蛋白、乳酸代谢、全转录组特征基因在内的五层联合质控判定体系，实现模型有效性的客观可量化评价。

本发明提供一种中药复方精油及其在制备治疗肺结节药物中的应用，涉及生物医药技术领域，所述中药复方精油以莪术、知母、半夏、枳实、七叶一枝花、葶苈子经水蒸气蒸馏提取的挥发油为核心组分，配伍冰片按特定比例复配而成。该精油可改善肺结节模型小鼠的全身状态、肌力及肺功能，并调控肺泡灌洗液中IL‑17A、TGF‑β的表达水平，从而发挥对肺结节的治疗作用。本发明为肺结节的中医药外治提供了一种副作用小、见效快、使用便捷的中药复方精油，具有较高的临床应用与产业化价值。

本发明涉及药物产品制造与制剂相关技术领域，尤其涉及一种抗结直肠癌的联合药物组合物及其制备方法，该组合物活性成分为抗结直肠癌卵黄抗体IgY与白头翁汤提取物，白头翁汤提取物由按如下质量份数配比的药材经水提法制得：白头翁27份、黄柏41份、黄连41份、秦皮41份。本发明优化卵黄抗体制备工艺，采用低浓度HCT‑116瘤细胞免疫母鸡，第三次免疫后提取抗体，结合PEG沉淀与亲和层析完成纯化；白头翁汤采用料水比1:9水煎、冻干制得提取物。二者最优协同浓度为白头翁汤提取物4μg/mL、IgY12.5μg/mL，可制成片剂、胶囊、注射剂。本发明工艺稳定、成本低廉，产物协同抗肿瘤效果优异，适合工业化生产与临床应用。