一种适用于猪源细胞IGF1R基因定点编辑的先导编辑系统及应用
本发明公开了一种适用于猪源细胞IGF1R基因定点编辑的先导编辑系统及应用,包括先导编辑器表达组件、epegRNA表达组件和nicking sgRNA表达组件,先导编辑器融合Cas9蛋白、猪源La蛋白功能结构域、Tf1逆转录酶,并共表达MLH1‑SB蛋白,epegRNA表达载体上添加筛选标记,即携带靶向猪IGF1R基因F731A或Y517A/R518E位点的RTT和PBS,使该系统可提高epegRNA稳定性和目标突变写入效率,降低错配修复对编辑产物保留的不利影响,更适合猪胎儿成纤维细胞的IGF1R基因的编辑,能够高效实现定点突变,为猪源细胞编辑、IGF1R研究及相关细胞模型构建提供了工具。