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本发明公开了用于检测浓香型白酒窖泥中Methanomethylophilaceae的引物、试剂盒及PCR方法，属于微生物鉴定技术领域，本发明公开了一种用于特异性鉴定Methanomethylophilaceae的引物对。所述引物对是针对Methanomethylophilaceae特有的编码甲醇甲基转移酶的基因保守序列设计而成，包括上游引物和下游引物。本发明通过上述引物对，利用qPCR或PCR方法可特异性检出浓香型白酒窖泥样品中的Methanomethylophilaceae。该检测方法特异性强、灵敏度高、可以准确快速的检测窖泥样品中的Methanomethylophilaceae，为浓香型白酒工艺优化提供技术支持。