一种3β-羟基类固醇脱氢酶突变体及其应用

本发明涉及生物酶工程技术领域，具体涉及一种3β‑羟基类固醇脱氢酶突变体及其应用。本发明提供的3β‑羟基类固醇脱氢酶突变体是在野生型3β‑羟基类固醇脱氢酶所示的氨基酸序列上进行点突变获得。本发明构建的3β‑羟基类固醇脱氢酶突变体，与野生型酶相比，该突变体的酶活力大大提高，是亲本的1.68~3.30倍，可以显著降低工业酶的使用量。同时，该突变体能特异性氧化3β‑熊去氧胆酸，生成3酮熊去氧胆酸，随后在3α‑羟基类固醇脱氢酶作用下转变为熊去氧胆酸，克服了在化学合成熊去氧胆酸过程中产生的3β‑熊去氧胆酸杂质难以去除的缺陷，为熊去氧胆酸的工业生产提供了广阔的应用前景。