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一种耐酸的库氏毕赤酵母及其在葡萄糖二酸合成中的应用
发明专利有效
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§ Ⅰ
卷宗概要
发明人
王琦; 肖锋; 郑华宝
IPC 分类
C12N 1/19 (2006.01)C12N 9/16 (2006.01)C12N 9/90 (2006.01)C12N 9/02 (2006.01)C12N 9/04 (2006.01)C12N 9/92 (2006.01)C12N 9/12 (2006.01)C12N 15/53 (2006.01)C12N 15/54 (2006.01)C12N 15/55 (2006.01)C12N 15/61 (2006.01)C12P 7/58 (2006.01)C12R 1/84 (2006.01)
本发明公开了一种耐酸的库氏毕赤酵母及其在葡萄糖二酸合成中的应用。以库得里阿兹威氏毕赤酵母为底盘，通过敲除EMP途径的pgi和/或pfk基因，整合肌醇一磷酸合酶、肌醇单磷酸酶、嗜热菌源肌醇加氧酶及含A39P/H99Y/H234K突变的糖醛酸脱氢酶基因，构建含有四个酶的多拷贝表达体系。利用CRISPR/Cas9系统将外源基因表达盒整合至EG位点，获得库氏毕赤酵母工程菌。该菌株在一个实验中的葡萄糖二酸产量可达3.22g/L，具有耐酸性强、无需酸碱中和、利用廉价底物等优势。本发明通过代谢途径优化与耐酸特性结合，为工业化生产葡萄糖二酸提供了高效稳定的微生物平台。