一种Cas12i和外切酶融合体介导的植物定点插入方法

本发明公开了一种Cas12i和外切酶融合体介导的植物定点插入方法。本发明提供了基于CRISPR基因编辑进行定点插入的载体，其表达含有核酸外切酶与Cas12i的融合蛋白，同时能够产生修复模板，修复模板有三种形式，其一是以DNA形式存在，其二是以DNA+RNA形式存在，其三是以RNA形式存在。本发明通过比较不同模板策略和融合外切酶等对细胞特别是植物细胞内源基因定点插入效率的影响，建立了基于Cas12i和外切酶融合体介导的植物定点插入技术体系，为研究农作物重要基因功能分析、细胞内基因互作及其分子网络解析，提供重要技术支撑。