一种外周血中微生物cfDNA定量时识别和排除污染物的方法

本发明提供了一种外周血中微生物cfDNA定量时识别和排除污染物的方法，S1.筛选出外周血与食管‑胃交界腺肿瘤共有细菌，提取细菌核酸；S2.根据细菌的特异核酸序列，设计相应的引物探针组合，利用荧光定量PCR对细菌核酸进行多重扩增；S3.利用R统计软件decontam，对S2中扩增后的特异核酸序列进行统计分类，获得一个统计分类程序；在外周血中微生物cfDNA的样本制备时，加入人工合成的外源DNA，设定一个识别样本混淆方法；S4.通过统计分类程序识别和排除污染物，并对外周血中微生物cfDNA进行定量。本发明方法可对外周血中的细菌核酸进行准确、快速和便捷的检测，同时识别和排除有污染的样本，避免出现检测时的假阳性。