青岛市农业技术推广中心（青岛市乡村振兴服务中心、青岛市农业科技广播电视学校）

本发明属于分子生物学检测技术领域，具体涉及一种小麦线条花叶病毒荧光Rt‑PCR检测试剂和方法。本发明的小麦线条花叶病毒荧光Rt‑PCR检测试剂通过在常规一步法荧光Rt‑PCR缓冲液中添加胆碱类深共熔溶剂与咪唑类离子液体，在反应体系中构筑独特的“离子‑氢键协同”缓冲微环境，实现对小麦粗提样品中多糖、多酚、腐殖酸复合抑制物的系统性清除，从而在免核酸纯化的前提下实现WSMV的荧光Rt‑PCR快速检测。本发明适用于口岸检疫、田间快检和抗病育种筛查，具有突出的抗基质干扰能力和操作便捷性。