原始名称记载: 安徽金禾实业股份有限公司; 安徽金禾合成材料研究院有限公司

本发明属于基因工程和酶工程领域，具体涉及一种蔗糖合酶突变体及其制备方法、产品和应用。所述突变体是在SEQ ID NO.1所示野生型蔗糖合酶氨基酸序列的基础上，第94位氨基酸由P突变成N，突变后的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；或第660位氨基酸由Y突变成H，突变后的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。该突变体可用于体外糖基化反应、植物遗传改良或工业生物催化，解决天然酶稳定性差、催化效率低的技术问题。

本发明属于精细化工与食品添加剂生产技术领域，具体涉及一种三氯蔗糖酯结母液萃取工艺及应用。该工艺先将三氯蔗糖酯结母液送入一级萃取塔，用纯水萃取，酯相进入溶剂回收套用，水相进入填装有孔树脂的吸收塔；树脂通过孔径选择性吸附水中小分子杂质、对三氯蔗糖几乎无吸附，吸附后水相进入二级萃取塔；二级萃取塔用乙酸乙酯萃取水相中的三氯蔗糖，乙酸乙酯相进入浓缩结晶环节，水相送至污水站。该工艺能有效去除影响结晶的小分子杂质，显著提升三氯蔗糖酯结结晶率与总收率，减少杂质富集和溶剂回收负担，降低能耗，保障产品质量，适用于规模化三氯蔗糖生产，尤其可用于食品级、医药级三氯蔗糖生产。

本发明属于生物酶技术领域，具体涉及一种用于合成莱鲍迪苷D的糖基转移酶突变体及其制备方法、产品和应用。所述糖基转移酶突变体是在SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的基础上，包含至少一个选自以下位置的取代突变：第158位氨基酸由S突变为F或第93位氨基酸由H突变成Q。该突变体可高效催化RebA向RebD的转化反应，大大加快了反应进程，提高了产物的生成速率和产量。这一成果有效克服了现有技术中糖基转移酶在催化该反应时普遍存在的活力低下、反应效率不高、稳定性不足等问题，为RebD的工业化高效合成提供了强有力的技术支持，具有重要的实际应用价值。

本发明名称为一种用于合成莱鲍迪苷M的糖基转移酶突变体及其产品和应用，属于基因工程技术领域。所要解决的技术问题为现有糖基转移酶及蔗糖合酶的酶活偏低、酶活稳定性不足，导致莱鲍迪苷M（RebM）合成效率不高，从而限制了酶法制备RebM的工业化应用。技术方案要点为提供一种糖基转移酶突变体，所述的突变体包括对UDP‑葡萄糖基转移酶UGT76G1进行突变，所述的UDP‑葡萄糖基转移酶UGT76G的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述的突变包括对SEQ ID NO.1的第83位进行突变，所述的糖基转移酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。

本发明属于基因工程和酶工程领域，具体涉及一种酶法生产莱鲍迪苷M的方法。所述的方法包括如下步骤：S1、底物中加入重组细胞破碎液混合液1，加入至缓冲液，得到预反应液1（重组菌株UGT11（S158F）和重组菌株AtSUS（P94N）的重组细胞破碎液的混合物），反应后收集沉淀；S2、沉淀溶解后，加入重组细胞破碎液混合液2（重组菌株UGT76G1（G83Q）和重组菌株AtSUS（P94N）的重组细胞破碎液的混合物），加入缓冲液，得到预反应液2，收集反应液，得到Reb M。本发明的方法能够有效解决传提取Reb M含量低、专一性差的问题，可实现Reb A向Reb M高达93.33%的转化率。