一种重组破伤风毒素蛋白rTT及其制备方法和应用

本发明公开了重组破伤风毒素蛋白rTT及其制备方法和应用，所述重组蛋白自N端至C端依次含His标签、改造外源多肽、两条通过柔性多肽串联的破伤风毒素片段，两条串联破伤风毒素片段通过双突变在分子内形成两个分子内二硫键，构成稳定的单链二聚体蛋白，该重组蛋白的编码核苷酸经大肠杆菌BL21(DE3)表达、低温诱导和纯化，即可获纯度≥95%的目的蛋白。该蛋白与双向油佐剂ISA201制备的亚单位疫苗使小鼠在100 LD攻毒剂量下实现100 %保护，保护效果优于截短的破伤风毒素重链片段TTc蛋白，该重组蛋白可用于破伤风预防疫苗及血清学诊断试剂。