重组芽孢杆菌属脂肪酶LIPBST与BSLA用毕赤酵母分泌表达的方法

本发明属于基因工程及酶工程技术领域，具体涉及一种重组芽孢杆菌属脂肪酶LIPBST与BSLA用毕赤酵母高效分泌表达的方法。所述方法包括：分别构建含有LIPBST和BSLA成熟肽编码序列的重组分泌表达载体，转化至毕赤酵母宿主中，通过优化各自的诱导表达条件（LIPBST为2% v/v甲醇浓度、诱导起始OD=3；BSLA为1% v/v甲醇浓度、诱导起始OD=1），实现两种脂肪酶的高效分泌表达。经发酵培养和亲和层析纯化，获得高纯度重组酶，LIPBST产量达230 μg/mL，酶活195 U/mL；BSLA产量达125 μg/mL，酶活126 U/mL。本发明首次在毕赤酵母中实现LIPBST与BSLA的高产表达，获得的酶制剂具有优异的碱性耐受性和中温活性，适用于洗涤剂、食品加工及生物催化等领域。