构建靶向捕获纳米孔测序文库的方法及其文库

本发明提供构建靶向捕获纳米孔测序文库的方法及其文库，所述方法包括：病原样本DNA/RNA的核酸共提取，对提取的核酸进行长片段逆转录，得到RNA/cDNA杂合链和DNA双链的核酸产物，对核酸片段化处理，制备成长片段待捕获文库，对待捕获文库使用封闭序列进行封闭，构建待测病原的捕获文库，对所述捕获文库进行ONT标签引物PCR扩增，得到病原的标签文库，将三代测序接头连接标签文库，得到靶向捕获纳米孔测序文库。本发明利用转座酶对RNA:cDNA杂合链的直接识别能力，在逆转录后无需传统建库中的补二链步骤，显著减少操作环节与时间消耗。结合长片段逆转录酶的使用，可获得更长的cDNA产物，为三代测序提供高质量的长读长模板。