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一种快速鉴定铁皮石斛的特异性基因序列、组合物、鉴定方法及应用
发明专利有效
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9权利要求 · 5 独立
§ Ⅰ
卷宗概要
发明人
师玉华; 邹俊; 向丽; 孙伟; 王梦月; 孟祥霄; 高冉冉; 尹青岗
IPC 分类
C12Q 1/6895 (2018.01)C12Q 1/6844 (2018.01)C12N 15/113 (2010.01)C12N 15/11 (2006.01)
本发明提供了一种快速鉴定铁皮石斛的特异性基因序列、组合物、鉴定方法及应用,属于基因检测技术领域。本发明克服了传统RPA‑CRISPR/Cas系统需物理分隔的两步反应模式,将RPA恒温扩增与CRISPR/Cas12b检测直接整合于单一反应管内,并基于ITS2序列差异区设计铁皮石斛特异RPA引物和sgRNA,来构建一种基于RPA‑CRISPR/Cas12b一步法快速鉴定铁皮石斛的方法,该方法可从源头上杜绝气溶胶污染引发的假阳性风险,操作简单、准确快速、灵敏度高,且可直接判定结果,不仅为铁皮石斛的现场药材筛查与市场监管提供了可视化的现场快检技术,也为其他中药材的快速鉴定研究提供了新的思路。