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一种基于瞬时转化和热激处理的杨树多基因共编辑的方法

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§ Ⅰ

卷宗概要

发明人

孙士林; 王玉成; 包文心; 及晓宇; 李丹丹

IPC 分类

C12N 15/82 (2006.01)C12N 15/113 (2010.01)C12N 15/29 (2006.01)A01H 4/00 (2006.01)

本发明涉及分子生物学技术领域,具体公开了一种基于瞬时转化和热激处理的杨树多基因共编辑的方法。本发明提供杨树多基因共编辑方法,通过农杆菌介导将多个sgRNA/Cas9系统递送至山新杨组培苗,不依赖外源基因的稳定整合,避免使用抗生素筛选,并结合热激处理显著提升Cas9蛋白活性;通过优化菌液浓度与热处理参数,实现双基因与三基因同步编辑,编辑效率分别达20%和14%以上,实现缩短周期、无外源残留、高效编辑、普适性强和操作简便等效果,为木本植物的多基因功能研究和精准育种提供了一个全新的、强有力的技术工具。