一种生产L-脯氨酸的重组菌及其构建方法与应用

本发明公开一种生产L‑脯氨酸的重组菌及其构建方法与应用，属于分子生物学和生物工程领域。本发明通过敲除L‑脯氨酸降解途径关键基因putA和aceA，将NADPH依赖的谷氨酸脱氢酶GdhA替换为NADH依赖的谷氨酸脱氢酶RocG，将可溶性吡啶核苷酸转氢酶SthA替换为吡啶核苷酸转氢酶PntAB，将PTS转运系统中的PtsG替换为葡萄糖激酶Glk，将GalR替换为葡萄糖促进剂Glf，将OmpT替换为磷酸烯醇丙酮酸羧化酶Ppc，并导入γ‑谷氨酰激酶ProB及其突变体和谷氨酸‑5‑半醛脱氢酶ProA，构建得到以葡萄糖为底物直接发酵生产L‑脯氨酸的重组菌。在常规发酵条件下，62小时发酵液中能够积累86‑119 g/L L‑脯氨酸，葡萄糖转化率0.33‑0.49 g/g，显著高于现有工艺。本发明原料成本低，发酵周期短，产量高，具有良好的工业化应用前景。