一种酶介导错配切割的鲫疱疹病毒荧光检测方法及试剂盒

本发明属于水产动物病原分子检测技术领域，公开一种酶介导错配切割的鲫疱疹病毒荧光检测方法及试剂盒。对离体组织或水体样品进行核酸粗提，采用正向引物与反向引物浓度比为1∶10的非对称重组酶聚合酶扩增体系，于39℃扩增靶标单链；随后加入含连续双碱基错配的荧光探针和错配内切酶，使探针与鲫疱疹病毒ORF66靶序列形成错配异源双链并经酶切产生荧光信号，根据荧光信号判断样品中是否含有目标核酸。该方法在同一反应管内分步完成，检测时间不超过60min，最低检出限为100拷贝/反应，可降低近缘病原核酸引起的非特异性信号，适用于鲫疱疹病毒现场快速检测。