济南赛盟生物技术有限公司

本发明公开了一种紫球藻藻红蛋白的集成提取纯化方法及其产品，属于生物分离工程领域。该方法将紫球藻原料重悬于PEG/磷酸盐双水相体系中，在双水相成相体系存在下反复冻融，使冻融破壁与双水相分配协同进行；收集PEG‑rich上相后，以甘油基低共熔溶剂强化提取；再通过二级双水相精纯；最后经超滤同时完成脱盐、浓缩和DES回收，超滤透过液中的DES经反渗透或纳滤浓缩后循环使用。本发明以二级双水相替代硫酸铵沉淀，实现了从新鲜藻液到高纯度产品的全流程一体化操作，产品纯度A/A≥4.5，经多批次验证DES单次回收率可达85%以上。

本发明公开了一种从条斑紫菜中制备试剂级藻红蛋白的方法，属于蛋白质分离纯化技术领域。该方法以条斑紫菜为原料，依次经冻干粉碎、反复冻融破壁、纤维素酶/木聚糖酶/甘露聚糖酶复合酶解释放、固液分离、双水相富集、疏水层析流穿除杂、疏水层析吸附洗脱、离子交换精抛光、超滤脱盐、除菌过滤和冷冻干燥，获得试剂级藻红蛋白冻干粉。本发明将冻融物理破壁与三酶靶向破壁协同，并结合疏水层析与离子交换层析在分离特性上互为正交、互为补充。本发明所得藻红蛋白纯度（A/A）≥5.0，总收率≥35%，无菌，SDS‑PAGE呈现藻红蛋白特征性亚基条带，可作为荧光标记试剂用于流式细胞术等生物医学研究领域。