北京欧利格生物医药科技有限公司

本发明属于寡核苷酸分离分析技术领域，公开一种以正己胺为离子对试剂的寡核苷酸LC‑MS定量方法，采用正己胺‑六氟异丙醇水溶液与乙腈构建离子对流动相，搭配高温梯度洗脱实现n‑2短链杂质与主产物基线分离；联用负离子高分辨质谱，依靠双高温脱溶与低源内裂解抑制离子对加合杂峰，将寡核苷酸电离集中于低电荷态，缩小扫描区间、提升微量杂质灵敏度。本发明采用UV纯度与质谱解卷积得到的MS纯度相乘计算组分真实含量，可单独定量主峰内共洗脱脱嘌呤杂质。10%～150%浓度范围线性相关性良好，精密度、重复性优异，可以实现寡核苷酸中低水平杂质的精准检出与定量，能够满足寡核苷酸药物质量控制中微量杂质的检测要求。