刘正飞

本发明涉及单克隆抗体制备技术和生物检测技术领域，具体涉及一种布鲁氏菌BacA蛋白的纯化及相应的单克隆抗体制备及应用。本发明纯化了布鲁氏菌BacA蛋白，通过杂交瘤细胞技术获得了一株阳性杂交瘤细胞株，命名1A7。所述单克隆抗体1A7重链可变区包括氨基酸序列为GYTLARRGMQCV的CDR1，氨基酸序列为IDGCDSYISG的CDR2以及氨基酸序列为AREGLLR的CDR3。所述单克隆抗体1A7轻链可变区包括氨基酸序列为QDVGNAVAWYQQ的CDR1，氨基酸序列为WASTRHTGVP的CDR2以及氨基酸序列为QQYSSS的CDR3。应用该单克隆抗体建立了竞争ELSA检测方法，该单克隆抗体能与猪种、牛种及羊种布鲁氏菌发生特异性反应；不与大肠杆菌、沙门氏菌和小肠结肠炎耶尔森菌发生特异性反应，为我国布鲁氏菌病的检测技术开发提供了支撑。