高培（广州）乳业有限公司

本发明涉及一种基于双信号放大酶联免疫反应的三聚氰胺检测方法及应用，本发明的检测方法通过“正己烷去脂+三氯乙酸沉蛋白”的两步样品预处理方法，有效去除乳制品中脂肪、蛋白对免疫反应的干扰，底物体系采用特定配比的TMB、过氧化氢与抗坏血酸，在该配比条件下，纳米酶催化HO氧化TMB产生蓝色一级信号，同时抗坏血酸被HO原位氧化生成脱氢抗坏血酸；脱氢抗坏血酸吸附于纳米酶表面，改变纳米酶表面电子状态、提升其过氧化物酶催化活性，实现循环催化的二级信号放大；本发明严格控制底物组分浓度比例，避免残留游离抗坏血酸造成TMB还原褪色，本发明检测操作简便，灵敏度高，检出限达0.015mg/kg，可检测极低浓度残留。