元の名称記録: 山东省农业科学院作物研究所

本发明属于基因工程技术领域，涉及一种小麦基因工程领域，具体涉及一种调控小麦镉积累的基因及其编码蛋白、应用。本发明利用CRISPR/Cas9将基因敲除，同时构建基因过表达植株，用Hi‑Tom测序技术和PCR逐代筛选获得纯合突变体。对40μmol/L Cd溶液处理5天后的野生型、纯合过表达和敲除植株进行金属含量测定、亚细胞组分金属测定、Cd化学形态测定和Cd离子流测定等分析，分析吸收和转运Cd的途径，从而探究金属转运蛋白吸收和转运Cd的生理和分子机制，丰富对小麦ABC金属转运蛋白的认识，为培育低Cd积累的优质小麦提供理论基础。

本发明公开了低肥力土壤条件下鉴定不同种子蛋白质含量小麦的引物对及其鉴定方法和应用。所述引物对包括核苷酸序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的上游引物1和上游引物2；以及核苷酸序列如SEQ ID No.3所示的下游引物。利用所述引物对，以提取的小麦基因组DNA为模板，进行KASP反应，产物进行荧光信号读取，若信号读取结果为Fam allele，小麦为BB基因型；若结果为Hex allele，小麦为bb基因型，且BB基因型的小麦种子蛋白质含量大于bb基因型的小麦种子。采用本发明的引物对可鉴定低肥力土壤条件下具有不同种子蛋白质含量的小麦，在小麦育种及低肥力土地开发利用中具有重要的应用价值。

本发明公开了用于鉴定小麦穗型的KASP引物对及其鉴定方法和应用。所述KASP引物对包括上游引物和下游引物，上游引物1和上游引物2的核苷酸序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示；下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。此KASP标记为小麦穗型突变基因功能性分子标记，该KASP分子标记对应的SNP位点为位于小麦1D染色体第57941628碱基处的G突变为A。本发明技术方案能够用于分子标记辅助选择，筛选小麦穗型新材料。利用本发明的KASP引物对可以简便、快捷、高通量的检测鉴定小麦穗型，可通过回交选择加速小麦的穗型改良。

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用细胞自噬蛋白ATG8鉴定小麦苗期抗寒性的方法。通过构建EGFP（enhancing GFP，增强型GFP）‑ATG8的载体，在不同小麦品种的叶部瞬时表达，通过观察EGFP‑ATG8在受到冷胁迫时的亚细胞定位变化即可进行小麦抗寒性的鉴定；本方案相比现有方案，只需要4℃低温胁迫条件即可，观察EGFP‑ATG8的亚细胞定位，便可知其抗寒性，具有低成本、操作简单、精准度高的优点。

本发明属于植物种植领域，公开了一种提高小麦耐盐性的方法，具体包括如下步骤：1）浸种：使用胍丁胺溶液浸泡小麦种子；2）培育：将步骤1）浸泡后的小麦种子置于盐胁迫环境下进行萌发培养。步骤1）中所述胍丁胺溶液浓度为0.5~5μM。本发明提出了一种提高小麦耐盐性的方法，通过一种小分子化合物胍丁胺对小麦种子进行浸种，增强小麦种子在盐胁迫环境下的萌发能力，促进幼苗生长，且具有使用方法简单、成本低的特点，为盐碱地小麦种植提供可靠的技术支持。同时，提供了胍丁胺在制备用于提高小麦耐盐性的试剂中的新用途，拓展胍丁胺的应用范围，并为作物抗盐栽培提供一种新的生物调控剂选择。