浙江生态环境集团有限公司

本发明公开了一种糖苷酶和蛋白酶联用提取微生物团聚体中胞外DNA的方法，属于环境DNA提取技术领域。该方法首先采用螯合剂对含有微生物团聚体的待提取样本进行前处理，初步瓦解微生物团聚体中的离子桥联作用；随后加入蛋白酶进行酶解反应以破坏蛋白骨架，反应后采用滤膜进行第一次过滤分离；采用糖苷酶处理上述膜上残留物，以切断团聚体中多糖骨架的主链和分支连接，反应结束后采用新的滤膜进行第二次过滤分离；最后将两次滤液合并后提取胞外DNA。本发明能够精准提取微生物团聚体中的胞外DNA，克服了现有螯合剂及蛋白酶法因忽略多糖骨架而导致的提取效率低下问题，对于准确评估水生态系统中的环境DNA、基因转移及微生物群落结构具有重要价值。