一种抗菌肽及其制备方法和应用

本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种抗菌肽的制备方法和应用，抗菌肽的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示，命名为L8。抗菌肽L8的制备方法，包括S1.获取L8目的基因片段；将L8目的基因片段与pLC载体连接，得到连接产物；将连接产物转化至大肠杆菌DH5‑α感受态细胞中，筛选阳性克隆，得到pLC‑L重组质粒；S2.以pLC‑L8重组质粒为底物，进行无细胞蛋白合成反应，得到抗菌肽L8；无细胞蛋白合成体系包括175mM谷氨酸钾、10mM谷氨酸铵、2.7mM草酸钾、33mM PEP、38mM复合氨基酸、10mM谷氨酸镁、2%(w/v) PEG‑8000、5nM pLC‑L8重组质粒、11.25mM乳糖和33.33%（v/v）粗提物、100mg/mL大肠杆菌tRNA、2.5nM T7 RNA聚合酶。本发明通过优化抗菌肽LR得到了抗菌肽L8，无细胞蛋白合成反应表达后的抗菌肽L8相较于LR具有更优的抑菌活性和生物安全性。