一种PEG介导的橡胶树叶片原生质体大质粒瞬时转化方法

本发明涉及植物遗传转化技术领域，公开了一种PEG介导的橡胶树叶片原生质体大质粒瞬时转化方法，包括以下步骤：S1、取橡胶树2龄内古铜期后期至变色期叶片1‑2克，放入0.6M甘露醇中浸泡10min，用手术刀除去主叶脉后，将其切成0.5~1mm宽的细长条，转入30ml酶液中，放于28℃暗培养室、60r/min摇床上酶解处理5h。通过优化包括离心转速、PEG作用时间及培养条件在内的转化步骤，并采用特定配方的转化试剂，突破了橡胶树原生质体瞬时转化技术中难以逾越的质粒大小限制，实现了将15kb以上的大质粒高效导入细胞，最终达到了超过15%的基因编辑效率。