六种鸡垂直传播性病毒多重RT-qPCR检测方法及应用

本发明公开了六种鸡垂直传播性病毒多重RT‑qPCR检测方法及应用，属于病毒检测技术领域。本发明根据CAV、ALV‑J、REV、ARV‑I、FAdV‑4、CAstV六种病毒基因保守区域设计特异性引物和探针；依次建立单重和多重TaqMan RT‑qPCR并优化反应体系并确立反应条件，本发明多重TaqMan RT‑qPCR的特异性好、灵敏度高，最低可检测到10copies/μL；用于临床样品检测时，可准确判断病毒类型，与染料法单重RT‑qPCR检测结果一致，且具有更高灵敏度。本发明适用于种鸡混合感染多种病原的早期快速检测和鉴别诊断，克服了应用常规方法检测体系和操作复杂、费时费力、敏感性较差的缺点，具有良好应用前景。