枯草芽孢杆菌随机整合表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶

本发明涉及分子生物学与工业酶，提出在枯草芽孢杆菌染色体随机整合表达D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶（DAEase）的体系及应用。采用mariner/Himar1或Tn7将含PgsiB/PnprE/PHpaII/PamyE、7‑20bp RBS与SEQ ID NO:2的表达盒整合；在42‑51℃去除温敏复制子，并可删除抗性标记。以KpRD/NADH 340nm连续光谱筛选并HPLC复核。3L补料分批68‑72h粗酶活≥3000U/mL。在55‑70℃、0.1mM Co、底物300g/L下，全细胞/粗酶催化D‑果糖得D‑阿洛酮糖，转化率≥25%，兼顾稳定性与合规性，适于工业化。