一种高效的异种器官移植供体猪多基因敲除方法

本发明公开了一种高效的异种器官移植供体猪多基因敲除方法，属于涉及生物医学工程领域，包括，步骤1，针对猪的GGTA1、CMAH和B4GALNT2三个基因设计特异性crRNA；步骤2，将crRNA与tracrRNA退火形成gRNA，再将所述gRNA与Cas9蛋白在体外组装形成ctRNP复合物；步骤3，将ctRNP复合物电转转入猪胚胎成纤维细胞中，对GGTA1、CMAH和B4GALNT2三个基因进行同时敲除。本发明方法操作简便、编辑效率高、脱靶效应低且无外源DNA整合风险，显著提高了异种器官移植供体猪的制备效率，具有广阔的应用前景。