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本发明属于生物医用材料与组织工程技术领域，具体的说是一种具有力学性能梯度匹配的人工生物肌腱及其分层制备方法，包括肌腱‑肌肉接头模拟区、肌腱本体模拟区和腱‑骨止点模拟区，各区沿纵向一体化连接并呈现结构、组分与力学性能的连续梯度变化。肌腱‑肌肉接头模拟区由PCL与明胶或胶原蛋白构成的无规纤维网络组成，负载IGF‑1微球；肌腱本体模拟区由PLLA与胶原蛋白构成的高度取向纤维束组成；制备方法包括：载药微球制备、多射流梯度静电纺丝构建纤维支架、可控提拉式梯度矿化及后处理。本发明实现了与天然肌腱相仿的力学梯度与生物功能，解决了界面应力集中与愈合不良问题。