天津怡和生物科技有限责任公司

本发明公开了一种采用间歇溶析‑冷却耦合结晶生产D‑甘露糖的方法，属于功能糖生产技术领域。本发明公开的一种采用间歇溶析‑冷却耦合结晶生产D‑甘露糖的方法，将D‑甘露糖水溶液真空蒸发浓缩至一定浓度，加入一定体积溶析剂创造过饱和度，随后向D‑甘露糖过饱和结晶液中加入晶种并控温养晶，然后匀速流加溶析剂，控制流加速率使溶液的过饱和度维持在较低的水平，从而有效控制晶体成核，最后进行降温结晶以提高D‑甘露糖收率。本发明通过分段式加入溶析剂耦合冷却的结晶方法生产D‑甘露糖，严格控制溶液的过饱和度释放，避免爆发成核产生伪晶，得到粒度分布均匀、纯度高的产品。

本发明公开了甘露糖6‑磷酸磷酸酶突变体及其在提高D‑甘露糖转化率中的应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明公开的甘露糖6‑磷酸磷酸酶突变体，在SEQ ID NO.9所示氨基酸序列的基础上，存在下述突变：D24T‑R199A‑A230L、D24T‑R199T、D24T‑R199V、D24T‑R199A、D24T、R199A、R199V、R199T或A230L。本发明利用多酶催化路线催化制备甘露糖，具有底物利用率高、成本低、甘露糖产率高等优点，适合规模化生产甘露糖。

本发明公开了甘露糖6‑磷酸磷酸酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明公开的甘露糖6‑磷酸磷酸酶突变体，在SEQ ID NO.9所示氨基酸序列的基础上，存在下述突变：V6L‑I163E‑M202F、V6F‑I163E‑M202F、V6L‑M202L、V6F‑M202F、V6L‑M202F、V6L、V6F、M202F、I163E或M202L。本发明利用多酶催化路线催化制备甘露糖，具有底物利用率高、成本低、甘露糖产率高等优点，适合规模化生产甘露糖。