构建靶向捕获纳米孔测序文库的方法及其文库
本发明提供构建靶向捕获纳米孔测序文库的方法及其文库,所述方法包括:病原样本DNA/RNA的核酸共提取,对提取的核酸进行长片段逆转录,得到RNA/cDNA杂合链和DNA双链的核酸产物,对核酸片段化处理,制备成长片段待捕获文库,对待捕获文库使用封闭序列进行封闭,构建待测病原的捕获文库,对所述捕获文库进行ONT标签引物PCR扩增,得到病原的标签文库,将三代测序接头连接标签文库,得到靶向捕获纳米孔测序文库。本发明利用转座酶对RNA:cDNA杂合链的直接识别能力,在逆转录后无需传统建库中的补二链步骤,显著减少操作环节与时间消耗。结合长片段逆转录酶的使用,可获得更长的cDNA产物,为三代测序提供高质量的长读长模板。