阔然生物医药科技（上海）有限公司

本发明属于医疗影像分析技术领域，具体涉及一种多重荧光染色精准定量头颈部及食管鳞癌PD‑L1 CPS的方法。该方法包括：在单张FFPE组织切片上通过多轮TSA染色进行PD‑L1、CK5/6、CD45和CD68的四标荧光染色，并辅以DAPI核染，且PD‑L1抗体置于最后一轮；对染色后的切片进行多光谱全片扫描，通过建立纯光谱库进行线性光谱拆分；将拆分后的图像导入分析系统，执行组织识别与分割、以及基于DAPI的细胞分割；将细胞分类并计数分子：、、；最后按公式计算CPS。本发明实现了单张切片上肿瘤细胞、淋巴细胞和巨噬细胞的精确区分和归类，避免了高温对PD‑L1抗原的破坏，确保了输出结果的可靠性，适用于头颈部鳞癌及食管鳞癌患者免疫治疗伴随诊断中的PD‑L1联合阳性评分检测。

本发明涉及图像处理技术领域，具体涉及荧光免疫组化图像中稀疏目标细胞的自动检测与计数方法，具体包括：对核定位基准图像，先粗分割确定核尺寸，再精细分割提取核质心；依据成像参数确定横向分辨尺度后，利用核质心局部密度反演分摊半径，以该尺度为下限截断；以横向分辨尺度对标记通道图像平滑提取梯度方向，由同通道背景噪声计算指向可信度，并对有效像素按分摊半径、距离及方向因子加权分摊至候选细胞，得到初始归属强度和归属份额来源台账。本发明能够降低密集区域信号错配造成的假阳性和假阴性，提高稀疏目标细胞检测与计数的准确性、可追溯性和稳定性。