舜丰生物科技（海南）有限公司

本发明公开了一种提高丹参酮含量的基因编辑方法，涉及植物基因工程技术领域。通过分别在基因和的转录起始点上游383bp和311bp区域插入1×PE转录增强子序列，在和基因的起始密码子上游区域插入翻译增强子TMV Ω序列，进行定点编辑。本发明的技术方案在原生质体水平可实现0.90%~3.30%的精确插入，在稳定转化体系中可获得2.17%~7.32%的编辑株；经分子验证后，目标基因和表达量提高约2.14~3.72倍，并进一步使总丹参酮含量提高约11.04%~53.85%。

本发明涉及一种通过基因编辑创制辣椒雄性不育系的方法，属于辣椒育种技术领域。本发明通过对辣椒花粉发育相关基因进行定点编辑，使目标基因失活，获得编辑材料；同时构建目标基因的回补表达载体并导入辣椒，获得可维持育性的回补材料；再利用编辑材料与回补材料杂交、自交，最终建立了可稳定繁殖的不育系和保持系。本发明创制的辣椒雄性不育系育性稳定，不受环境条件影响，且不育系不含外源编辑元件，安全性高；利用本方法获得的不育系和保持系可直接应用于杂交辣椒品种的配组与选育，能够有效克服传统辣椒雄性不育系转育周期长、步骤繁琐的缺陷，大幅缩短育种进程，提升辣椒杂种优势利用的育种效率，为辣椒杂交制种提供了全新的技术路径。