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2‑溴丙烯酰胺辅助环化测序(BACS)方法允许在单碱基分辨率下定量剖析假尿苷(Ψ)。基于溴丙烯酰胺环化化学，BACS在逆转录(RT)过程中诱导Ψ至C突变，而不是截短或缺失特征，因此与基于CMC和BS的方法相比，提供了更高的分辨率，并能够更准确地定量Ψ化学计量。与已知方法相比，本发明的BACS允许精确鉴定Ψ位置，特别是在密集修饰的Ψ区域和连续尿苷序列中。因此，检测Ψ的方法、组合物和试剂盒是可能的。在RNA分子的情况下，这允许在这样的序列中检测和测序Ψ。