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本发明提供了一种腐败梭菌α毒素的纯化和保存方法、组合物和应用，涉及生物技术领域。该纯化方法包括在纯化腐败梭菌α毒素的过程中，使每一步骤中腐败梭菌α毒素接触的液相环境中至少含有5mM的EDTA；该保存方法包括将使用上述纯化方法获得的腐败梭菌α毒素在含有EDTA、甘油、葡萄糖、蔗糖和山梨醇中至少一种的试剂中保存。上述纯化和保存方法可有效的避免腐败梭菌α毒素降解。

本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种培养O型FMDV高产细胞株的筛选方法。通过间接免疫荧光标记法建立了一种培养O型FMDV高产细胞株的筛选方法，通过同时检测BHK‑21细胞表面αvβ1与αvβ6阳性受体在群体细胞中所占的比例是否均≥25%，来筛选对O型FMDV感染性强、敏感性高的细胞株。该筛选方法可在接毒前准确预判细胞株性能，筛选方向明确、结果可靠。本方法无需接毒、收毒及病毒含量检测，4天内即可完成筛选，极大缩短了周期，降低了成本与生物安全风险，操作简便、重复性好，为高效口蹄疫灭活疫苗的生产提供了稳定可靠的细胞基材。

本发明提供了一种改造的布鲁氏菌及其制备方法和应用、疫苗，涉及生物技术领域。该改造的布鲁氏菌的Omp25基因替换为IFN‑γ基因。含有该改造的布鲁氏菌的疫苗免疫动物后排菌时间短，且能提高细胞免疫效果，有利于布鲁氏菌的防控。