원래 이름 기록: 张英杰; 靳坤霞; 张雍禾; 河南得欣生物科技有限公司; 河南得邦生物科技有限公司

本发明涉及生物工程技术领域，且公开了一种小牛脾蛋白肽的制备及方法，包括以下步骤：原料超低温保存与活化、低温脉冲电场协同酶解预处理、基因工程菌定向表达酶复合体系酶解、微波辅助灭酶、梯度离心分离、分子印迹‑亲和色谱联用纯化、超声辅助脱色脱腥、真空冷冻浓缩、喷雾冷冻干燥、多维度活性验证；通过采用基因工程菌定向表达酶复合体系进行酶解，显著提高了酶解效率。三种基因工程酶按特定活性比协同作用，解决了传统单一或普通复合酶特异性差、水解不彻底的问题，使蛋白水解度达到35%以上，有效提升了目标肽的得率。同时，精准控制酶解温度、pH值和搅拌转速等参数，避免了水解过度或不足的情况，保证了产物活性的稳定性。

本发明涉及生物产品制造技术领域，且公开了一种动物源性肽的制备方法及应用，包括依次进行的原料预处理、酶解、纯化、脱色、脱苦、浓缩、干燥及成品检测步骤，所述原料预处理包括原料清洗、粉碎、配液及梯度低温超声处理；原料清洗为用流动清水冲洗3‑5次，牛骨等较硬原料可先用硬毛刷清洁表面，猪皮等软组织原料可浸泡10‑15分钟后冲洗；提升提取效率与活性保留：通过梯度低温超声预处理，在破坏原料细胞结构的同时避免高温损伤活性成分，较传统方法提取率提高15‑20%；复合酶解体系结合实时监测，酶解效率提升20‑25%，活性肽得率提高10‑15%；双膜耦合纯化工艺协同去除大分子杂质和小分子盐分，纯化效率提高30‑40%，成本降低20‑25%，产物纯度可达90%以上。