基于CRISPR/Cas9的棉花GhBBM基因编辑材料、创制方法及其应用
本发明公开了基于CRISPR/Cas9的棉花基因编辑材料、创制方法及其应用。本发明构建了CRISPR/Cas9靶向sgRNA的编辑载体,通过农杆菌介导的棉花遗传转化技术获得了三种KO‑基因编辑材料,三种基因编辑材料的编辑类型均不相同。本发明对获得的KO‑材料进行脂肪酸各组分及含量的测定,发现基因编辑材料和受体WT材料相比,KO‑材料总游离脂肪酸含量显著上升,且油酸含量占比增加。通过的DAP‑seq和RNA‑seq数据分析,说明在KO‑材料中,表达量增加,促进棉花种子游离脂肪酸起始合成;表达量也随之减少,棉花种子中油酸向亚油酸转化的效率降低,进一步证明基因编辑材料种子游离脂肪酸含量上升,油酸含量占比增加。