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本发明公开了一种血氨测定试剂盒，该试剂盒包括试剂1（R1）、试剂2（R2）；其特征在于，所述试剂1由以下组分组成：缓冲液、无机盐、谷氨酸、ATP、TOOS、过氧化物酶、谷氨酰胺合成酶、丙酮酸氧化酶、丙酮酸、防腐剂；所述试剂2由以下组分组成：缓冲液、表面活性剂、MBTH、除氧剂、BSA、防腐剂。本申请的试剂盒以Trinder反应为基本原理，以MBTH+色原方式进行显色，通过加入除氧剂及特定表活稳定MBTH的方式成功解决了其机载稳定性差问题，试剂整体性能评价结果较好。