一种柑橘木虱dsRNA纳米农药的低成本规模化生产工艺
本发明公开了一种柑橘木虱dsRNA纳米农药的低成本规模化生产工艺,属于农业生物技术领域。本发明以大肠杆菌HT115(DE3)为底盘菌株,构建携带双向T7启动子的重组表达载体,通过高密度发酵工艺生产靶向柑橘木虱关键基因的dsRNA;采用食品级壳聚糖为原料制备纳米载体,通过静电吸附作用形成稳定的dsRNA‑壳聚糖纳米复合物。本发明通过优化发酵培养基、诱导条件和纯化工艺,将dsRNA生产成本降低至0.3美元/g以下;采用一步法制备纳米复合物,无需复杂设备,适合工业化大规模生产。本发明生产的柑橘木虱dsRNA纳米农药稳定性好、递送效率高,对柑橘木虱的致死率达85%以上,且对非靶标生物安全,为柑橘黄龙病的绿色防控提供了重要技术支撑。