一种无抗性筛选标记质粒、制备方法、重组菌与应用

本发明提供了一种无抗性筛选标记质粒、制备方法、重组菌与应用，属于基因工程技术领域。该质粒包括EM7启动子、ccdA41抗毒素基因和R6K γ复制原点；所述质粒分子长度小于600bp，不含抗生素抗性基因。该质粒分子量小、无抗生素抗性基因，有效规避了使用抗生素带来的安全风险，且严格依赖染色体整合ccdB的指定宿主复制，满足生物安全要求，适用于疫苗、重组蛋白等生物制品的安全生产。本发明利用上述重组菌生产无抗性筛选标记质粒简便快捷，成功率高，本发明的重组菌利用GT115‑ccdb菌株与含有ccdA41抗毒素基因的质粒，通过毒素‑抗毒素复合调控机制，实现质粒在宿主中的稳定维持与表达。