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一种高肌内脂肪基因编辑猪的制备方法及应用

발명유효
6조회수
9청구항 · 3 독립항
§ Ⅰ

개요

발명자

李紫聪; 林胜仪; 吴珍芳; 顾婷; 洪林君

IPC 분류

C12N 15/85 (2006.01)C12N 15/12 (2006.01)C12N 15/113 (2010.01)A01K 67/0278 (2024.01)

本发明公开了一种高肌内脂肪基因编辑猪的制备方法及应用,该方法包括如下步骤:S1:构建用于在猪ROSA26座位定点整合的肌肉特异过表达PPARγ2基因的表达载体;S2:构建用于在ROSA26座位切割的CRISPR/Cas9系统表达载体;S3:将步骤S1和S2中构建的表达载体混合转染猪胎儿成纤维细胞;S4:筛选转染后的细胞,并获得PPARγ2基因编辑阳性细胞;S5:将获得的阳性细胞作为体细胞克隆的核供体细胞,进行体细胞克隆,并将获得的重构胚移植至代孕母猪子宫内,待仔猪出生获得高肌内脂肪基因编辑猪。通过该方法制备的基因编辑猪的背肌和腿肌中肌内脂肪含量均显著高于对照组,且该性状可稳定遗传。该方法为培育肉质优良的基因编辑猪新品种提供了可靠的育种材料和技术路径。