一种小麦TaWRKY65-3A基因高产优异等位变异的检测方法和应用

本发明公开了一种小麦TaWRKY65‑3A基因高产优异等位变异的检测方法和应用，涉及小麦基因工程技术领域，该方法包括以下具体步骤：S1：采用CTAB法或植物基因组DNA提取试剂盒提取待测小麦材料的基因组DNA，提取的基因组DNA满足PCR扩增要求；S2：针对TaWRKY65‑3A基因第1265位SNP位点，以基因组DNA为模板经两轮PCR扩增后，用限制性内切酶Sma I对二轮PCR扩增产物进行酶切处理；本发明通过深入分析TaWRKY65‑3A基因的多态性位点，精准确定6个关键SNP位点，并发现这些位点在小麦自然群体中存在连锁现象，形成3种主要单倍型，其中Hap‑3A‑2单倍型对应的等位变异为高产优异等位变异，基于这些关键SNP位点，尤其是第1265位和第1658位SNP位点，设计了特异性引物及dCAPS标记，建立了完整的检测技术方案。