一种具有增强耐受性的Bsm DNA聚合酶突变体及其应用

本发明公开了一种具有增强耐受性的Bsm DNA聚合酶突变体及其应用，属于生物技术领域，通过对野生型Bsm DNA聚合酶的DNA结合域与催化域交界区域进行定点修饰，该突变体在完全保留5’→3’聚合酶活性及3’→5’核酸外切酶校对活性的基础上，显著提升了对抑制剂、宽pH范围、高盐浓度及反复冻融的耐受性。该突变体能够直接对含多种抑制剂的全血、土壤、粪便等复杂样本中的靶核酸进行高效、高保真扩增，无需预先核酸纯化步骤，极大地简化了操作流程。本发明为高抑制剂环境下的病原体快速分子诊断、现场即时检测以及困难模板的克隆提供了核心酶学工具，具有重要的应用价值。