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기록
枯草芽孢杆菌随机整合表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶
발명유효
2조회수
10청구항 · 6 독립항
§ Ⅰ
개요
발명자
吴敬; 刘展志; 王龙涛
IPC 분류
C12N 15/75 (2006.01)C12N 15/90 (2006.01)C12N 15/61 (2006.01)C12N 1/21 (2006.01)C12N 9/90 (2006.01)C12P 19/24 (2006.01)C12P 19/02 (2006.01)C12R 1/125 (2006.01)
本发明涉及分子生物学与工业酶，提出在枯草芽孢杆菌染色体随机整合表达D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶（DAEase）的体系及应用。采用mariner/Himar1或Tn7将含PgsiB/PnprE/PHpaII/PamyE、7‑20bp RBS与SEQ ID NO:2的表达盒整合；在42‑51℃去除温敏复制子，并可删除抗性标记。以KpRD/NADH 340nm连续光谱筛选并HPLC复核。3L补料分批68‑72h粗酶活≥3000U/mL。在55‑70℃、0.1mM Co、底物300g/L下，全细胞/粗酶催化D‑果糖得D‑阿洛酮糖，转化率≥25%，兼顾稳定性与合规性，适于工业化。