用于多基因定点敲入细胞的报告质粒系统和筛选方法

本发明提供了一种用于多基因定点敲入细胞的报告质粒系统和筛选方法。具体地，本发明提供了一套多基因敲入报告质粒系统，包括多个目的基因的sgRNA质粒，多个基因组供体质粒，一个目的基因敲入报告质粒，一个报告质粒供体质粒和Cas9质粒。其中，报告质粒包含截短的eGFP基因，并引入目的靶位点序列，精准地报告基因敲入事件。本发明还公开了一种筛选方法，在针对多基因敲入编辑时，仅通过一个目的基因敲入报告质粒筛选多个基因同时敲入的方法，并提高分选基因纯合敲入细胞的效率。该方法可高效应用于通过HDR修复进行基因敲入，包括精确的点突变、大片段插入或删除，获得报告系统无残留的干净基因敲入细胞系。