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기록
一种提高CRISPR-dCas9蛋白原核表达量的方法
발명유효
10청구항 · 2 독립항
§ Ⅰ
개요
발명자
漆楠; 朱文婷; 张潇
IPC 분류
C12N 15/70 (2006.01)C12N 15/31 (2006.01)C12N 15/55 (2006.01)C12N 9/22 (2006.01)C12R 1/19 (2006.01)
本发明涉及一种提高CRISPR‑dCas9蛋白原核表达量的方法。具体地，本发明涉及一种提高原核细胞中dCas9蛋白表达水平的方法，其中，将亮氨酸拉链基因序列与dCas9基因序列连接并引入原核细胞中。本发明的方法可获得高纯度和高浓度的dCas9蛋白，dCas9蛋白表达量显著高于常用的使用麦芽糖结合蛋白(MBP)作为融合分子伴侣的方法，并且所获得的dCas9‑lzip融合蛋白仍具有正常在sgRNA的引导下靶向结合DNA的能力，连接lzip序列对于dCas9的功能无影响。