制备工程化外泌体与微小RNA药物的结合物的方法、结合物及其应用

本发明提供一种制备工程化外泌体与微小RNA药物的结合物的方法、结合物及其应用。所述方法包括以下步骤：（1）通过连续的超速离心结合尺寸排阻色谱法纯化从牛乳中获得高纯度乳源外泌体；（2）采用超声破碎法从高纯度乳源外泌体中清除内源RNA，得到内源RNA清除的工程化外泌体；（3）通过电穿孔方法，将微小RNA药物装载到所述内源RNA清除的工程化外泌体，得到内源RNA清除的工程化外泌体与微小RNA药物的结合物；（4）通过胆固醇和PEG2000将缺血性心肌靶向肽锚定于外泌体表面，得到内源RNA清除的心肌靶向的工程化外泌体与微小RNA药物的结合物。本发明的方法消除了内源RNA干扰、提高心肌靶向效率并且生产工艺标准化。