一种高脂饮食诱导NAFLD小鼠肝实质和非实质细胞分离的改进方法

本专利提出一种高脂饮食诱导非酒精性脂肪性肝病小鼠肝实质与非实质细胞分离的改进方法。该方法通过喂食含60%脂肪的高脂饲料12‑16周，成功构建NAFLD小鼠模型。采用改良的两步胶原酶灌注技术，结合低浓度酶溶液和精确控制的消化时间，有效减少细胞损伤。利用密度梯度离心法，通过特定比例的Percoll溶液实现肝实质细胞与非实质细胞的高效分离与纯化。流式细胞仪与分子生物学技术验证显示，分离的细胞存活率高，纯度优异。此方法为研究NAFLD发病机制及药物靶点发现提供了高质量的原代细胞材料，具有重要应用价值。