一种提高酿酒酵母基因编辑效率的方法

本发明公开了一种提高酿酒酵母基因编辑效率的方法。未添加同源重组模板的前提下，基于非同源末端连接修复，本发明通过外源添加蛋氨酸或改造自噬关键基因使得CRISPR/Cas9编辑效率提高。该方法包括自噬缺陷型菌株的构建、蛋氨酸的添加及靶向目标基因的sgRNA、CRISPR/Cas9表达系统。CRISPR/Cas9系统包括核酸定位信号SV40和由半乳糖诱导型GAL1启动子和CYC1终止子控制其表达的核酸酶Cas9。突变效率的改善表明该方法能有效提高酿酒酵母的突变效率，可广泛应用于酿酒酵母进化、表型优化及工业菌株构建，为食品发酵、生物能源及药用蛋白生产等领域提供高效的菌株改良工具。