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一种DNAJB6a基因特异性敲除的小鼠模型的构建方法与应用
발명유효
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§ Ⅰ
개요
발명자
钱方媛; 周梦寒; 郭玉冬; 施汶莹; 雷梓瑄; 费凡; 王怡轩; 李天悦
IPC 분류
C12N 15/89 (2006.01)C12N 15/12 (2006.01)A01K 67/0276 (2024.01)C12N 15/113 (2010.01)C12N 9/22 (2006.01)
本发明公开了一种DNAJB6a基因特异性敲除的小鼠模型的构建方法与应用,属于基因工程领域技术领域。包括以下步骤:S1:设计针对小鼠DNAJB6基因第9‑10号外显子区域的gRNA序列;S2:体外转录制备Cas9mRNA和gRNA;S3:将Cas9mRNA和gRNA显微注射到小鼠受精卵中;S4:将注射后的受精卵移植到假孕母鼠体内,获得F0代小鼠;S5:通过基因型鉴定筛选阳性F0代小鼠,并与野生型小鼠交配获得F1代杂合子小鼠;S6:F1代杂合子小鼠互配获得F2代纯合子小鼠,建立DNAJB6a基因特异性敲除小鼠模型。本发明提供的构建DNAJB6a基因敲除鼠模型的构建方法,操作简便,构建过程时间短,基因型稳定,能有效得到DNAJB6a基因敲除的小鼠。